菌落總數(shù)的測定現(xiàn)常用菌落計數(shù)器進行測定，一般將被檢樣品制成幾個不同的10倍遞增稀釋液，然后從每個稀釋液中分別取出1mL置于滅菌平皿中與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合，在一定溫度下，培養(yǎng)一定時間后(一般為48小時)，記錄每個平皿中形成的菌落數(shù)量，依據(jù)稀釋倍數(shù)，計算出每克(或每ml)原始樣品中所含細菌菌落總數(shù)。
 

　　菌落計數(shù)器的安全檢測方法：
 

　　1.操作方法：培養(yǎng)到時間后，計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)。可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)，計算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù)，進行報告。
 

　　2.到達規(guī)定培養(yǎng)時間，應立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù)，應將平板放置于0-4℃，但不得*過24h。
 

　　3.計數(shù)時應選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標準要求為25~250個菌落)，若有二個稀釋度均在30~300之間時，按國家標準方法要求應以二者比值決定，比值小于或等于2取平均數(shù)，比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小，均以平均數(shù)報告)。
 

　　4.若所有稀釋度均不在計數(shù)區(qū)間。如均大于300，則取較為高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如均小于30，則以較為低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告之。如菌落數(shù)有的大于300，有的又小于30，但均不在30~300之間，則應以較為接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如所有稀釋度均無菌落生長，則應按小于1乘以較為低稀釋倍數(shù)報告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計算出的菌落數(shù)按估算值報告。
 

　　5.不同稀釋度的菌落數(shù)應與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應基本接近)，即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象，則應視為檢驗中的差錯(有的食品有時可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象，如酸性飲料等)，不應作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。
 

　　6.當平板上有鏈狀菌落生長時，如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，則應作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，則每條鏈均應按一個菌落計算，不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數(shù)。如有片狀菌落生長，該平板一般不宜采用，如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
 

　　7.當計數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時)，但分布很均勻，可取平板的一半或1/4計數(shù)。再乘以相應稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
 

　　8.菌落數(shù)的報告，按國家標準方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時，按實有數(shù)字報告，如大于100時，則報告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計算。固體檢樣以克(g)為單位報告，液體檢樣以毫升(ml)為單位報告，表面涂擦則以平方厘米(cm2)報告。